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    培養基配制流程和注意要點

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    培養基配制流程和注意要點

    發布日期:2021-09-24 作者: 點擊:

    今天培養基廠家凱林貿易跟大家具體聊聊培養基配制流程和注意要點。


    培養基配制程序如下∶

    1.將貯存的各種母液按順序依次放好。

    2將各種潔凈的玻璃器皿如培養瓶、量筒、燒杯、吸管、玻璃棒、漏斗等,放在指定的位置。準備好蒸餾水或無離子水及瓶蓋或封口膜、包紙、橡皮筋等。

    3.稱取規定量的瓊脂和蔗糖,將瓊脂置于精鋼鍋或者電飯煲中,加水至培養基最終容積的3/4或1/2,隨之加熱使之溶解,注意防止湖鍋底和溢出。瓊脂必須完全溶化,以免造成濃度不均。

    瓊脂不能過多,不然會導致培養基太硬,含水太少,通氣不良;反之,培養基太軟,植物材料則難以固定。由于瓊脂較難溶解,所以在制備培養基時,應首先加熱溶解。


    培養基廠家

    4.按母液順序,根據不同母液的濃縮倍數移取規定的量,如配制1LMS培養基移取濃縮10倍的大量元素母液為100mL。母液加完后,再經過計算加入所需要的植物生長調節劑。

    在加入母液或生長調節劑時,應事先檢查這些藥品是否已經變色或產生沉淀,若出現這些現象就停止使用。加完后一并倒入已溶化的瓊脂中,并再加入蔗糖。

    5.加蒸餾水定容至培養基的最終容積。

    6. pH值調整。培養基的pH值(酸堿度)直接影響培養物對離子的吸收,所以過酸或過堿都會影響植物的生長。此外,瓊脂培養基的pH值還影響到其凝固程度,所以當培養基配制好以后,應隨即進行pH值的調整(一般pH值為5.6-6.0)。

    建議是用酸度計測試,即快又準,如無此設備也可以用精密pH試紙(應在干燥容器中保存,以免吸潮而失效)。若培養基偏酸就用1mol/L的氫氧化鈉來調節,偏堿則用1mol/L的鹽酸來調節。

    經高壓蒸汽滅菌后,由于某些成分的分解(如蔗糖)或氧化,使培養基的pH值會降低(一般會降低0.2左右)。有時玻璃皿質量較差,其中一部分物質溶解,也會影響酸度的變化,這些再調整培養基的pH值的時候都要考慮進去。

    一般在比較成熟的情況下,會在培養基高壓蒸汽滅菌前調高一定的pH值,以便適應滅菌后pH值下降的問題,具體調高多少可根據自身實驗摸索。

    7.培養基的分裝。瓊脂約在40°℃以下時凝固,因此配制好的培養基要趁熱分裝,分裝時一般用燒杯、漏斗直接精選分注。若條件允許,用培養基灌裝機來分注會更加方便。

    分裝時要掌握好分注量,多了即浪費又減小培養物的生長空間;少了又會因營養不足而影響生長,一般以占培養容器1/4- 1/3左右為宜,培養基在培養容器中的厚度約為1.5cm。

    分裝時要注意不要將培養基沾到管壁上,以免引起污染。分裝后立即塞上棉塞或者蓋上瓶蓋或封好封口膜,并在培養瓶上貼標簽或用記號筆在瓶壁上作好標注,然后進行滅菌。


    培養基配制流程圖如下:


    培養基配制流程


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    關鍵詞:培養基配制,凱林貿易,培養基廠家

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